參考文獻(xiàn)

1)  Kimizuka F,et al.Production and characterization of functional domains of human

fibronectin expressed inEscherichia coli. J Biochem. (1991) 110: 284-291.

2)  Hanenberg H, et al. Colocalization of retrovirus and target cells on specific fibronectin fragments increases genetic transduction of mammalian cells.Nat Med. (1996) 2: 876-882.

3)  Hanenberg H, et al. Optimization of fibronectin-assisted retroviral gene transfer into human CD34+ hematopoietic cells.Hum Gene Ther. (1997) 8: 2193-2206.

4)  Pollok KE,et al.High-efficiency gene transfer into normal and adenosine deaminase-deficient T lymphocytes is mediated by transduction on recombinant fibronectin fragments.J Virol. (1998) 72: 4882-4892.

5)  Chono H, et al. Removal of inhibitory substance with recombinant fibronectin-CH-296 plates enhances the retroviral transduction efficiency of CD34+CD38- bone marrow cells.J Biochem. (2001) 130: 331-334.

6）  Barbara Savoldo,et al.CD28 costimulation improves expansion and persistence of chimeric antigen receptor–modified T cells in lymphoma patients.J Clin Invest.( 2011) May 2; 121(5): 1822–1826.

[1]張慧穎. RetroNectin活化的細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療晚期原發(fā)性肝癌的臨床研究[D].鄭州大學(xué),2014.

[2]蔣盼,曠世佳,劉興光,肖棟濤,楊菁,張雁,汪華.冷凍聯(lián)合iCIK細(xì)胞治療口腔惡性黑色素瘤的T細(xì)胞免疫效應(yīng)分析[J].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版),2013,7(11):4944-4949.

[3]徐本玲,袁龍,高全立,范瑞華,張成娟,宋永平.重組纖維連接蛋白誘導(dǎo)自體CIK聯(lián)合IFN-α治療晚期肝癌療效[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2011,46(05):694-696.

[4]張興華. 剔除調(diào)節(jié)性T細(xì)胞增強(qiáng)RAK過(guò)繼免疫治療機(jī)制的研究[D].北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,2011.

[5]張興華,袁偉,趙晨,馬潔,趙平.R etronectin和CD3mAb聯(lián)合培養(yǎng)CD56~+細(xì)胞用于治療胰腺癌的研究[J].實(shí)用腫瘤雜志,2011,26(02):113-118.

[6]韓穎,于津浦,李慧,曹水,任寶柱,齊靜,安秀梅,張廼寧,任秀寶,郝希山.重組人纖維蛋白片段對(duì)CIK細(xì)胞增殖的影響及其可能機(jī)制研究[J].中國(guó)腫瘤臨床,2010,37(02):71-75.

[7]杜微麗. 纖維連接蛋白誘導(dǎo)的CIK細(xì)胞的生物學(xué)特性和殺瘤活性的實(shí)驗(yàn)研究[D].中國(guó)醫(yī)科大學(xué),2009.

[8]任瑋,王志華.重組人纖維蛋白片段誘導(dǎo)CIK的增殖及對(duì)肺癌耐順鉑細(xì)胞的殺傷作用[J].生物工程學(xué)報(bào),2008(08):1373-1380.

[9]楊建民,Michael S Friedman,李嶠,James J Mule,Alfred E Chang,Kevin T McDonagh.轉(zhuǎn)染嵌合性T細(xì)胞受體基因小鼠T淋巴細(xì)胞的體外抗腫瘤作用[J].中國(guó)腫瘤生物治療雜志,2006(04):243-248.

文獻(xiàn)簡(jiǎn)述

Retronectin重組人纖維蛋白除了提高逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)染效率，還能在CD3單克隆抗體的協(xié)作下，增加T細(xì)胞、CIK細(xì)胞和RAK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的擴(kuò)增效率。

T細(xì)胞的傳統(tǒng)擴(kuò)增刺激方法是使用CD3單克隆抗體結(jié)合IL-2，再添加Retronectin可以增加T細(xì)胞的擴(kuò)增效率。并且，用這種方法擴(kuò)增得到的T細(xì)胞含有更多比率的少分化T細(xì)胞——naive T 細(xì)胞。

[1] 張慧穎. RetroNectin活化的細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療晚期原發(fā)性肝癌的臨床研究[D].鄭州大學(xué),2014.

研究發(fā)現(xiàn)，重組人纖維蛋白（RetroNectin-RN）聯(lián)合抗CD3單克隆抗體體外包被培養(yǎng)和擴(kuò)增CIK細(xì)胞時(shí)可以使CD3Ab與T細(xì)胞的接觸和黏附進(jìn)一步增加，不僅可以縮短細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間，而且可進(jìn)一步提高細(xì)胞的培養(yǎng)效率并避免CIK細(xì)胞殺傷活性的降低。

關(guān)鍵詞：晚期原發(fā)性肝癌; RetroNectin; CIK; 臨床研究;

[2] 任瑋,王志華.重組人纖維蛋白片段誘導(dǎo)CIK的增殖及對(duì)肺癌耐順鉑細(xì)胞的殺傷作用[J].生物工程學(xué)報(bào),2008(08):1373-1380.

Retronectin重組人纖維蛋白對(duì)CIK細(xì)胞有很強(qiáng)的激活作用,可使其細(xì)胞增殖總數(shù)達(dá)524.77倍,其主要效應(yīng)細(xì)胞CD3+CD56+可達(dá)(31.40±1.91)%;對(duì)肺癌耐順鉑細(xì)胞DDP-A549的殺傷作用明顯高于其親代藥物敏感株A549(P<0.01)。但兩組CIK細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷率在相同效靶比時(shí)無(wú)明顯差異(P>0.05)。RetroNectin能顯著增強(qiáng)CIK增殖活性,但對(duì)CIK細(xì)胞的殺傷活性并無(wú)明顯影響。CIK能夠顯著抑制DDP-A549的生長(zhǎng),可用于耐順鉑肺腺癌的免疫治療。

關(guān)鍵詞：細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞; RetroNectin; 增殖; 肺癌細(xì)胞; 殺傷活性;

[3] 韓穎,于津浦,李慧,曹水,任寶柱,齊靜,安秀梅,張廼寧,任秀寶,郝希山.重組人纖維蛋白片段對(duì)CIK細(xì)胞增殖的影響及其可能機(jī)制研究[J].中國(guó)腫瘤臨床,2010,37(02):71-75.

重組人纖維蛋白片段（RetroNectin）能夠通過(guò)調(diào)控細(xì)胞周期,抵抗凋亡而促進(jìn)CIK細(xì)胞增殖,其機(jī)制可能為RetroNectin與CIK細(xì)胞上VLA-4及VLA-5兩個(gè)位點(diǎn)結(jié)合進(jìn)而通過(guò)Vav1蛋白作為第二信號(hào)活化T細(xì)胞。

關(guān)鍵詞：重組人纖維蛋白片段; CIK細(xì)胞; Vavl;

[4] 張興華. 剔除調(diào)節(jié)性T細(xì)胞增強(qiáng)RAK過(guò)繼免疫治療機(jī)制的研究[D].北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,2011.

Retronectin重組人纖維蛋白和CD3mAb聯(lián)用所培養(yǎng)獲得RAK細(xì)胞具有較強(qiáng)的增殖能力,培養(yǎng)后細(xì)胞表型絕大多數(shù)是CD3+CD8+T細(xì)胞。在RAK細(xì)胞培養(yǎng)前加以調(diào)節(jié)性T細(xì)胞剔除的步驟,能夠在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步放大細(xì)胞增殖和殺傷能力。

關(guān)鍵詞：調(diào)節(jié)性T細(xì)胞; 過(guò)繼免疫治療; Retronectin;

[5] 張興華,袁偉,趙晨,馬潔,趙平.R etronectin和CD3mAb聯(lián)合培養(yǎng)CD56~+細(xì)胞用于治療胰腺癌的研究[J].實(shí)用腫瘤雜志,2011,26(02):113-118.

CD3mAb和Retronectin重組人纖維蛋白聯(lián)合培養(yǎng)CD56+細(xì)胞的方法能夠提高細(xì)胞的增殖效率和殺傷活性,具有良好的臨床細(xì)胞治療應(yīng)用前景。

關(guān)鍵詞：胰腺腫瘤/治療; 殺傷細(xì)胞,天然; 免疫療法,過(guò)繼; 細(xì)胞,培養(yǎng)的; 重組融合蛋白質(zhì)類; 單核細(xì)胞/免疫學(xué);

[6] 尹健. 外周造血干細(xì)胞純化、體外擴(kuò)增及多藥耐藥基因轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)研究[D].天津醫(yī)科大學(xué),2003.

利用逆轉(zhuǎn)錄病毒作載體將多藥耐藥基因?qū)朐煅杉?xì)胞，在轉(zhuǎn)染中予細(xì)胞因子支持，并利用Retronectin重組人纖維蛋白以提高轉(zhuǎn)染效率。在SCF+IL一3+FL+TPO+EPO的支持下，利用Retronectin重組人纖維蛋白可以使逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的多藥耐藥基因的轉(zhuǎn)染效率達(dá)到20%，基本滿足了臨床治療的需要。

關(guān)鍵詞：外周造血干細(xì)胞; 純化; 擴(kuò)增; 多藥耐藥基因;

[7] 楊建民,Michael S Friedman,李嶠,James J Mule,Alfred E Chang,Kevin T McDonagh.轉(zhuǎn)染嵌合性T細(xì)胞受體基因小鼠T淋巴細(xì)胞的體外抗腫瘤作用[J].中國(guó)腫瘤生物治療雜志,2006(04):243-248.

Retronectin重組人纖維蛋白結(jié)合離心法轉(zhuǎn)染經(jīng)抗CD3/CD28單抗活化的小鼠T淋巴細(xì)胞,轉(zhuǎn)染效率可達(dá)50%以上。轉(zhuǎn)染嵌合性T細(xì)胞受體基因的小鼠T淋巴細(xì)胞在體外可通過(guò)細(xì)胞因子釋放和CTL效應(yīng)發(fā)揮顯著的抗腫瘤作用。

關(guān)鍵詞：嵌合性T細(xì)胞受體; 基因轉(zhuǎn)染; 免疫治療; 小鼠; T淋巴細(xì)胞;

RetroNectin® 重組人纖維蛋白片段

產(chǎn)品英文名：TAKARA RetroNectin®(Recombinant Human Fibronectin Fragment)，F(xiàn)N CH-296

產(chǎn)品中文名：TAKARA RetroNectin®重組人纖維蛋白片段，F(xiàn)N CH-296

RetroNectin^®是在大腸桿菌中產(chǎn)生的重組人纖維蛋白片段FN CH-296。 當(dāng)包被在培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)板表面時(shí)，RetroNectin^®能顯著增強(qiáng)逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移到哺乳動(dòng)物細(xì)胞中。

RetroNectin^®重組人纖維蛋白片段和激發(fā)型CD3單抗可分別與T淋巴細(xì)胞上的VLA和TCR結(jié)合，兩者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK，通過(guò)Ras途徑刺激T細(xì)胞的增殖和分化，使其獲得上千倍的增殖。

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